1•质粒作为基因工程的载体应具备那些条件？

一、1•质粒作为基因工程的载体应具备那些条件？

1：具备一个或者多个限制酶的切点，以便外源基因的插入。

2：具有标记基因便于筛选。

3：在宿主细胞内稳定存在。

二、用作克隆载体的理想质粒一般具备哪些特点？

　　用作克隆载体的理想质粒一般具备下述特点：　　

①具有松驰型复制子（如ColE1），复制子（replicon）是质粒自我增殖所必不可少的基本条件，并可协助维持使每个细胞含有一定数量的质粒拷贝。　　

②在复制子外存在几个单一的酶切位点（或多克隆位点），以便目的DNA片段插入。　　

③具有插入失活的筛选标记，理想的质粒载体应具有两种抗菌素抗性标志，如氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr）等，以便从平板中直接筛选阳性重组子。　　

④分子量相对较小和较高的拷贝数。此外，质粒的缺点是容量较小，一般只能接受小于15kb的外来DNA，插入片段过大会导致重组子扩增速度减慢，甚至使插入片段失活。主要是对目的基因克隆，建立DNA文库和cDNA文库，其上有复制子即可。

三、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？

1.有自身的复制子

2.有限制性核酸内切酶的酶切位点，即多克隆位点

3.有可供选择的遗传标志，以区别阴性和阳性重组子

4.有足够的容量

5.可通过特定方法导入细胞

6.若是表达载体，还应具有启动子、前导序列、增强子、加尾信号等DNA调控元件

四、质粒作为基因工程常用载体必须具备的条件？

质粒作为载体必须具备的条件：多个酶切位点、对受体细胞没有危害并易于分离、能自我复制并稳定保存、具有特殊的标记基因，质粒广泛存在于生物界，从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人类机体中都含有。

从分子组成看，有DNA质粒，也有RNA质粒，从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒，其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。

质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子，存在于细胞质中，但酵母除外，酵母的2μm质粒存在于细胞核中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性

五、理想催化剂载体具备什么条件？

⑴具有能适合反应过程的形状和大小；

⑵有足够的机械强度，能经受反应过程中机械或热的冲击；有足够的抗拉强度，以抵抗催化剂使用过程中逐渐沉积在细孔里的副反应产物（如积碳）或污物而引起的破裂作用；

⑶有足够的比表面，合适的孔结构和吸水率，以便在其表面能均匀地负载活性组分和助催化剂，满足催化反应的需要；

六、质粒所需具备的条件？

（1）要具有限制酶的切割位点（2）要有标记基因（如抗性基因）以便于重组后重组子的筛选

（3）能在宿主细胞中稳定存在并复制

（4）是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来

2、最常用的载体是质粒，它是一种裸露的，结构简单的，独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子

3、其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒

质粒的本质是小型环DNA

质粒上具有复制原点，能自我复制

质粒是基因工程最常用的运载体

七、克隆载体质粒必须具备的元件？

基因克隆载体必须具备三个条件，具有能使外源DNA片段插入的克隆位点；能携带外源DNA进入受体细胞，或游离在细胞质中进行自我复制，或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制；必须具有选择标记，以便筛选承载外源DNA的受体细胞。

目前原核受体细胞的载体主要有细菌质粒（松弛型）和λ噬菌体两类，真核细胞受体的载体主要有SV40病毒（用于动物转化）和Ti质粒（用于植物转化）。

八、理想的办公环境应具备哪些条件？

理想的办公环境应具备以下条件:

一是内在条件，即公司的硬实力。试想如果公司是一个实力雄厚，发展长远的大公司，在这样的公司上班，如何不开心？

二是外在条件，即公司提供给员工的办公环境。办公室宽敞，公司制度人性，管理规范，各种各样的文化生活丰富多彩，工作秩序井然有序。

当然，任何事情只要是理想就只是个人自我愿望或者追求，毕竟理想美好，现实骨感。任何公司提供给员工理想的工作环境时，也需要员工有足够的适应能力，否则，真的很骨感。

那么，加油吧。

九、理想的工业发酵菌种应具备什么条件？

1.能在廉价原料制成的培养基上生长，且生成的目的产物产量高、已与回收

2.生长较快，发酵周期短

3.培养条件易于控制

4.抗噬菌体及杂菌污染的能力强

5.菌种不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定

6.对放大设备的适应性强

7.菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素。 为加快筛选速度,通常采用下列几种方法:(平皿快速检测法:利用菌体在特定固体培养基平板上的生理生化反应,将肉眼观察不到的产量性状转化成可见的“形态”变化,包括纸片培养显色法、变色圈法、透明圈法、生长圈法和抑制圈法等。 (形态变异的利用:微生物的形态特征及生理活性状态与微生物的代谢产物生产能力有一定关系。有时,菌体的形态变异与产量的变异存在着一定的相关性。可以利用这种对突变型的形态、色素和生长特性的了解和判断作为初筛的依据。 (计算机技术的应用:由于现代计算机技术的发展,计算机技术和生物技术相结合,已能用于菌种的筛选。例如,我国阳葵等(2000)[16]以分形和多重分形理论为基础,以计算机图像识别技术为手段,对霉菌绿僵菌(Metarhiziumsp.)菌落形态进行了定量描述。发现菌落的生长形态特征与菌种性能好坏有一定的对应关系。根据多重分形特征与菌种性能相关性设计的分类器,可以用于优良菌种的自动识别,速度快,与人工分离筛选的实验数据相吻合。

十、质粒作为克隆载体的条件及性质是什么？

克隆载体是能够通过限制性内切酶,将目的DNA片段整合进去,并且能够转入宿主细胞进行表达的生物DNA。

通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质.将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖.常见的载体有质粒,噬菌粒,酵母人工染色体。

对载体的要求：

①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力.

②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好.

③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制.这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点.

④容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作.

⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。